一、服务概况

嘉美生物Masson染色又称马松三色染色，是结缔组织染色中最经典的方法，主要用于鉴别胶原纤维和肌纤维。该技术通过特定染料组合，使胶原纤维呈蓝色或绿色、肌纤维呈红色、细胞核呈蓝黑色，广泛用于评估肝纤维化、心肌纤维化、肺纤维化等纤维化病变的病理研究。

二、技术原理

基于阴离子染料分子大小与组织渗透性的差异：小分子染料（如丽春红、酸性品红）可穿透结构致密的肌纤维，使其呈红色；大分子染料（如苯胺蓝、亮绿）只能进入结构疏松的胶原纤维，使其呈蓝色或绿色。

三、服务流程与技术路线

①脱蜡至水→②Weigert铁苏木素染核（5-10 min）→③丽春红酸性品红染色（5-10 min）→④磷钼酸分化（3-5 min）→⑤苯胺蓝或亮绿复染（5 min）→⑥脱水透明→⑦中性树胶封片→⑧显微镜镜检。（石蜡切片与冰冻切片适用性详见FAQ）

四、服务说明与样本要求

1、石蜡切片：甲醛固定组织，4℃运输；切片需充分脱蜡

2、冰冻切片：固定组织常温运输（夏季须垫冰袋），新鲜组织干冰运输，-20℃保存

3、骨组织：置于20倍体积固定液中固定24h以上，常温运输

4、细胞爬片：4%多聚甲醛固定15min，PBS覆盖，4℃运输和保存

特别说明：固定推荐使用Bouin氏液或Zenker氏液，固定时间一般24-48小时；若已使用甲醛固定，可在脱蜡至水后用Bouin液后固定过夜。实验前需明确样本类型及数量，TUNEL反应后清洗需严格增加次数以避免非特异性着色。

五、交付内容

1、高质量Masson染色成品玻片

2、高清数字图像（3张/切片）或全切片扫描图像

3、胶原定量分析报告（可选）：胶原面积百分比、纤维化程度分级等

4、完整实验报告（含方法步骤、试剂信息、结果判读）

六、应用领域

广泛应用于纤维化评估、器官硬化性疾病观察、肿瘤微环境研究等：

1、肝纤维化：评估胶原纤维分布和含量，判断纤维化分期

2、心肌纤维化：评估心肌梗死后的修复过程和纤维化面积

3、肾间质纤维化：显示肾小管间质胶原纤维增生情况

4、肺纤维化：观察肺泡间隔胶原纤维沉积

5、肿瘤病理：评估肿瘤间质成分、侵袭边界及基质反应

6、组织修复：评估伤口愈合胶原产生与成熟度、疤痕组织

七、常见问题（FAQ）

1、染色整体偏红或偏蓝：偏红包，增加苯胺蓝染色时间；偏蓝包，增加丽春红品红染色时间或减少苯胺蓝时间。分化不足/过度也需调节磷钼酸时间

2、细胞核染色过淡或过深：过淡，使用新鲜配制铁苏木精，适当延长染色时间；过深，缩短染色时间并增加洗涤

3、染色不均或模糊不清：取材固定不当，需规范取材、保证固定充分；脱水透明不彻底或包埋蜡温过高，需重新处理

4、染色易脱片：组织本身破碎或过硬，使用防脱载玻片；控制切片厚度4μm为宜

5、石蜡vs冰冻切片：石蜡切片形态更佳，适用于常规病理诊断；冰冻切片可保留抗原，适用于术中快速诊断

6、脱钙骨组织能否Masson染色：可以。未脱钙骨组织切片经Masson染色后胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色，但需特殊处理流程